色譜分析過程中緩沖液的正確使用方法及重要性

色譜分析過程中，緩沖液是*的，因為要用它來調節流動相的pH值，緩沖鹽使用不當，后果可是吃不了兜著走。

比如說，色譜柱壓升高、柱效下降、保留時間異常等等不良影響：

1）柱壓升高；

原因：緩沖鹽使用不當導致緩沖鹽析出，堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙，阻礙流動相傳質，引起柱壓升高。

2）相同化合物的保留時間發生變化；

原因：如果沒有沖洗干凈就進行進樣，色譜柱內含有的鹽會使化合物的保留時間發生變化.

3）柱效下降；

原因：i）有些緩沖鹽會滲入到鍵合相的深處，損害硅膠基體，導致色譜柱鍵合相流失，柱床變松，柱效下降；ii）凝結在鍵合相表面，使C18碳鏈難以舒展，對物質的保留能力下降，導致柱效下降。因此用過緩沖鹽后需要對色譜柱進行沖洗，水中緩沖鹽濃度較大時應特別引起注意。

使用前和使用后的處理都是有講究的哦！

1. 使用后的處理：用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相*的區別是，用于沖洗的流動 相不含緩沖鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期保存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩。

用與分析時含水比例相同的流動相（與分析用流動相*的區別是，用于沖洗的流動相不含緩沖鹽）進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長期保存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩. 緩沖液可以提供離子平衡的反離子，并使流動相保持一定的離子強度和ph值，減少拖尾。北京富瑞恒創科技有限公司，成立于2009年8月，成立至今已經和國內多家教育機構，全國各地多家企業有過長期的合作關系，專注于新型材料試驗機的研究，長期聘請清華大學精密儀器系的專家為技術顧問，并成立新型材料檢測儀器研發中心。
    北京富瑞恒創科技有限公司是集專業設計、開發、生產與銷售于一體的高新技術股份制企業，專注于新型材料試驗機的研制、材料檢測技術的提高及材料試驗方法的創新，是國內的材料試驗檢測儀器的生產企業。
富瑞恒創儀器研發部擁有行業內zui的、的研發力量及技術團隊，，并成立新型材料檢測儀器研發中心，是對推動國內材料檢測技術的提高和試驗方法創新的重要技術保證力量。富瑞恒創同時還與中科院自動化研究所、國防科技大學等全國數十所科研院所開展緊密合作，并為中國國fang軍工企業及航天科技企業和重點實驗室定制生產了大量標準和非標準的測試儀器。

2. 使用前的處理： 在使用緩沖鹽作流動相之前需要用不含緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱，直至基線平穩。 原則上，用于沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用于沖洗用的流動相中不含緩沖鹽。理由：緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機溶劑。用含緩沖鹽的（特別是做流動相的水為飽和的緩沖鹽溶液時）流動相進行分析時，如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先沖洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時，緩沖鹽將會在色譜柱柱體上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害.

注意事項什么的，是關注的重點！

1：避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用。

2：緩沖液要現配現用，往往緩沖液是良好的菌類培養液，隔天或放置長時間實驗時會有很多怪現象發生。

3：實驗后不可用有機溶劑直接過度，有機溶劑會處使鹽類析出，造成液路或色譜柱堵塞，可用95：5的水甲醇沖洗。

4：使用緩沖液要及時掌握ph范圍，做到胸中有數。

5：清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗。

6：長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，可考慮一定周期用10%硝酸沖洗一下液路（拆下柱子，走30ml，再用5倍水沖洗）可以避免液路的堵塞。

7：選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。

如果流動相中有機溶劑的比例很高是不能用來沖洗緩沖鹽的，是洗不出來的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇沖洗，是可以把緩沖鹽沖洗出來的，然后用純的有機溶劑來保護柱子。的方法是使用與流動相相同濃度不含鹽的流動相進行清洗。但就是速度慢一些。用水是為了快速替換，一般在15分鐘以內，且用0.8的流速較好. 如果用純水沖，容易造成鍵合的碳鏈的流失，用5%~10%甲醇水溶液沖. 可以用純水代替流動相中的緩沖液，有機相不變。這樣沖洗柱子比較穩妥。